你(nǐ)應知(zhī)道(dào)的(de)新型冠狀病毒2019-nCoV實驗‌πε↑室檢測內(nèi)容都(dōu)在這(zhè)了(le)

血液學檢查

病毒感染相(xiàng)關的(de)血液學檢查主要(yào)包括血常規、血生(shēng)✔☆§化(huà)以及其他(tā)針對(duì)性的(de)檢測項∞☆®≈目，相(xiàng)關指标為(wèi)臨床常用(yòng)的(de)病毒∑β☆☆感染診斷指标，為(wèi)疾病的(de)輔助診斷提供依據。

1、血常規

血常規中的(de)許多(duō)項具體(tǐ)指标都(dōu)是(shì)一←↕₽(yī)些(xiē)常用(yòng)的(de)敏感指标，對(duì)機(jī)體(tǐ)內(nèβ€♣∑i)許多(duō)病理(lǐ)改變都(dōu)有(yǒu)敏感反映，其中又(yò•"↔βu)以白(bái)細胞計(jì)數(shù•&$©)、紅(hóng)細胞計(jì)數(shù)、血紅(hóng)蛋白(bái)和(hé)血小(γ×xiǎo)闆最具有(yǒu)診斷參考價值，許多(duō)✘ '×患者在病因不(bù)明(míng)時(shí)可(kě)以做(z£ ♥÷uò)血常規檢查對(duì)其進行(xíng)輔助診斷。此外(wài)，血常規檢查還(hái)是(↑≠shì)觀察治療效果、用(yòng)藥或停藥、繼續治療或停止治療、疾病複發₽∏£或痊愈的(de)常用(yòng)指标。

NCOVID19肺炎發病初期白(bái)細胞總數(shù)大(dà)部分(fēn)降低(dī)✘• ∏或正常，淋巴細胞計(jì)數(shù)減少(shǎo)，單β×↔核細胞增加或正常。淋巴細胞絕對(duì)值如(rú)果小(xiǎo)♣±β≠于0.8×109/L，一(yī)般建議(yì)3 d後​↕±複查血液常規變化(huà)。根據鐘(zhōng)南(nán)山(shān)院士的(dε<₹e)最新研究發現(xiàn)82.1％的(de)患者淋巴細胞減少(shǎo)、36.2％≤σ§的(de)患者血小(xiǎo)闆減少(shǎΩ✘£o)，總體(tǐ)患者中觀察到(dào)白(bái)細胞減少(shǎo)的(de)比例約占3σ←3.7％，嚴重病例白(bái)細胞、淋巴細胞減少(shǎo)、血小(xiǎo)闆減少(sh≥λ≠ǎo)明(míng)顯。

2、血生(shēng)化(huà)：肝酶、心肌酶、乳酸脫氫酶、肌紅(hóng)蛋✔✔白(bái)、肌鈣蛋白(bái)

血生(shēng)化(huà)是(shì)檢•≠測存在于血液中的(de)各種離(lí)子(zǐ)、糖類₩ 、脂類、蛋白(bái)質以及各種酶、激素和(hé)< →機(jī)體(tǐ)的(de)多(duō)種代謝(xiè)産物(wù)‌®≥的(de)含量，可(kě)以為(wèi)醫(yī)生(shē<↕↓ng)提供診斷與治療依據，并能(néng)幫助臨床确定病情、監測治療效果。

NCOVID19肺炎部分(fēn)患者出現(xiàn)肝酶、心肌酶、乳酸脫氫酶、血沉和(hé)λ‍肌紅(hóng)蛋白(bái)增高(gāo)，部分(fēn)危重者可(kěε→↑↔)見(jiàn)肌鈣蛋白(bái)增高(gā £↑"o)。

3、其他(tā)檢測項目：C反應蛋白(b®σ$ái)（CRP）、降鈣素原（PCT）、D-二聚體(tǐ)、血沉、凝血像、血氣分(fēn)析、乳'§酸等

針對(duì)感染性疾病臨床上(shàng)常采用(yòng)各種針對‍§₹(duì)性的(de)檢測項目進行(xíng)輔助診斷，為(wèi∑"≤)醫(yī)生(shēng)提供診斷與治療依據≠γ₽。

CRP和(hé)PCT的(de)檢測對(duì)鑒别是(shì)否合并肺部的(de)細菌感染有(₽"γyǒu)一(yī)定價值，多(duō)數(shù)NCOVID19患者CRP和(hé)血沉升高©&(gāo)，重症患者D-二聚體(tǐ)明(<∏‌míng)顯升高(gāo)，同時(shí)出現(xiàn)凝血功能(n׶éng)的(de)障礙，外(wài)周血管的(de)微£≤(wēi)血栓形成。此外(wài)，血氣分(fēn)析有(yǒu)助于判斷重症患✘λ∏者的(de)氧合情況，結合乳酸的(de)升高(gāo)可(kě)以篩查高₽§£(gāo)危的(de)氧合障礙患者

CT醫(yī)學影(yǐng)像檢查

CT是(shì)用(yòng)X線束對(duì)人(rén)體(tǐ)某部一(yī)定'σ←厚度的(de)層面進行(xíng)掃描，由探測器(q§€ì)接收透過該層面的(de)X線，轉變為(wèi)可(kě)見(jiàn)光(guāng)後，♦δ由光(guāng)電(diàn)轉換變為(wèi)電(diàn)信号，再經模拟/數(shù)字轉換¶€≠€器(qì)（analog/digitalconveε✘•rter）轉為(wèi)數(shù)字，輸入計(jì)算(suàn)機(jī)處理(lǐ)。

新冠病毒CT的(de)影(yǐng)像學表現(xiàn)α∏☆•與很(hěn)多(duō)其他(tā)病毒性肺炎，如(rú)流感、呼吸道(d€β∞£ào)合胞病毒、腺病毒感染等比較類似，很(hěn)難做(zu✔¶£ò)鑒别性診斷。CT（電(diàn)子(zǐ)計(jì)算(∑πσsuàn)機(jī)斷層掃描）作(zuò)為(wèi)臨床影(yǐng)像 σ✔學篩查指标具有(yǒu)重要(yào)價值，≤<ε另外(wài)無論從(cóng)早期診斷、鑒别診斷、排除診斷還(hái)是(shì)最終确診等‍≠≠∞方面都(dōu)還(hái)具有(yǒu)一(yī)定的(de)↕•± 局限性，更無法替代病原學診斷。因此，目前的(de)技(jì)♦φ÷<術(shù)水(shuǐ)平下(xià)，最​←§終的(de)确診還(hái)是(shì)要(yào)靠試劑盒核酸檢測。 ¥

呼吸道(dào)病原學檢測

呼吸道(dào)病原學檢測是(shì)指采用(yòng)醫(yī)學檢測σ↕技(jì)術(shù)手段針對(duì)進入人(rén)體(tǐ)的(de)呼吸道(d÷£₹ào)病原體(tǐ)進行(xíng)檢測，其目的(de)是(shì)确定呼吸道(♠★✔→dào)病原體(tǐ)感染的(de)發生(shēng)和(hé™×)性質，在疾病早期提供恰當的(de)治療方案，并采取有(yǒu)效的(de)預防措施，防→≥止感染傳播造成的(de)危害。

呼吸道(dào)病原學檢測均為(wèi)病原體(tǐ)的(de)針對(duì‌βδ)性檢測，醫(yī)學上(shàng)在使用(yòng)某 $種針對(duì)性檢測項目做(zuò)臨床診斷時(shí)常用(☆←yòng)敏感性（Sensitivity）和(hé)特異性（Specificity）≤÷'來(lái)衡量檢測項目的(de)準确度和(hé)有(yǒu≠£)效性。因此我們在這(zhè)裡(lǐ)先把敏感性和(hé)特異性的(de)概念及™✔'其影(yǐng)響講清楚。

如(rú)圖所示，試驗指各類檢測項目，在評價某種檢測項目♠β鑒别區(qū)分(fēn)病例組（陽性病例）和(hé)非病例組‍¶（陰性病例）的(de)能(néng)力時(shí)，将病例的(de)真實情況作(zu©₩→ò)為(wèi)橫坐(zuò)标，檢測項目得(de)出的(de)檢測結果作(γαλzuò)為(wèi)縱坐(zuò)标，真實情況與檢測結果一(yī)緻時(shí)檢測©‌∑結果為(wèi)真，不(bù)一(yī)緻時(shí)檢測結果為(wèi ™)假。由此引申出敏感性和(hé)特異性等概念如( ↑±rú)下(xià)：

A.敏感性（具有(yǒu)該特性的(de)對(duì)象被  預知(zhī)的(de)可(kě)能(néng)性大(dà)小(xi•εǎo)）=真陽性率=a/a+c；

B.特異性（對(duì)象所具有(yǒu)的(de)特殊屬性的(de)程度）=真陰性率=✘♦σ€d/b+d；

C.漏診率=1-敏感性=c/a+c；

D.誤診率=1-特異性=b/b+d

此外(wài)，最重要(yào)的(de)是(sh§∏≥♥ì)可(kě)以借由上(shàng)圖分(fēn)析敏感性與特異性的(de)關$∏系：

A. 高(gāo)敏感性→上(shàng)述a增大(dà)→L線下(xi∑‍​à)移，無限接近(jìn)X軸→c、d越來(lái)越小(xiǎo)，b越來(lái)越大(dα∞ à)，即低(dī)漏診率，高(gāo)誤診率和(hé)低(dī)特異性（ ∏低(dī)真陰性率）。

B. 高(gāo)特異性→上(shàng)述d增大(dà↔≈)→L線上(shàng)移，無限接近(jìnπ↕>)+∞→a、b越來(lái)越小(xiǎo)，c越來(lái)越大(d∏ à)，即高(gāo)漏診率，低(dī)誤診率和(hé)低(dī)敏感性（低(dī)真陽性率）γ€‍。

由此可(kě)見(jiàn)，高(gāo)敏感性與高(gāo)特異εφ性不(bù)可(kě)兼得(de)，高(gāo)敏感性×♦φ‍則低(dī)特異性，高(gāo)特異性則低(dī)敏感性。可(kě)采用(y★&§↕òng)敏感性高(gāo)與特異性高(gāo)的(de)不π≈φ(bù)同檢測方法相(xiàng)結合的(de)方式提高(gāo)整體(tǐ)檢測的≥㮀(de)準确度。

接下(xià)來(lái)我們向大(dà)家(jiā)介紹病原學檢測的(de)各種技(j≈ ì)術(shù)方法：

1、病毒培養分(fēn)離(lí)與鑒定

病毒培養一(yī)般有(yǒu)細胞培養和(hé≥≠)雞胚培養（9-11日(rì)齡雞胚）這(zhè)兩種方法。從(↑≠♣cóng)呼吸道(dào)标本培養分(fēn)離(lí)出的(dΩ ∏e)病毒進行(xíng)鑒定常作(zuò)為(& wèi)呼吸道(dào)病原體(tǐ)實驗室診斷的(de)金(jīn)δ↕≤ 标準，其敏感性和(hé)特異性均在90%以上∞¶(shàng)，但(dàn)多(duō)數(shε₩↕ù)病毒培養比較困難，技(jì)術(shù)難度高(g'§φ§āo)且操作(zuò)複雜(zá)，生(shēng)¥ε₩™物(wù)安全條件(jiàn)要(yào)求高(gāo)，檢測周期長(cháng)，一(yīγ•→ )般不(bù)應用(yòng)于臨床檢測。

國(guó)家(jiā)衛健委發布的(de)《流行(xíng)性感冒診療方案（20★×19年(nián)版）》指出“從(cóng)呼吸道(dào)标本培養分(fēn)離(​"÷lí)出流感病毒是(shì)流感診斷的(de)金(jīn)↑&¶标準。但(dàn)由于病毒培養周期較長(cháng)，生(shēng)物(wù)安全條件(jiàn<"•")要(yào)求高(gāo)，不(bù)建議(yì)應用(₽★™®yòng)于臨床診療”。無獨有(yǒu)偶，在目前公布的(de)各項新型冠狀♥≥₽÷病毒2019-nCoV防治診療指南(nán)中均未把病毒培養分(fēn)離(lí¥₩≥)與鑒定列入病原學檢測項目。

2、病毒抗原檢測

病毒的(de)結構一(yī)般由外(wài)層的(de)衣殼蛋白(bái)包含病毒核酸物(w₩&ù)質組成，一(yī)般來(lái)說(shuō)病毒的(de)®γ✘&衣殼蛋白(bái)可(kě)作(zuò)為(wè<​₩i)病毒抗原（Virus antigen）通(tōng)過∞₽•病毒抗原檢測技(jì)術(shù)被檢測到(dào ≈)。病毒抗原檢測技(jì)術(shù)主要(yào)采用(yòng)免疫層析技(jì)•$↕↑術(shù)，利用(yòng)具有(yǒu)高(gāo)度 γ•特異的(de)單克隆抗體(tǐ)來(lái)識别₩≠£呼吸道(dào)标本中的(de)病毒抗原，待測樣本中如(rú)有(yǒu)相(xiàng)對(du₹πσì)應的(de)抗原，與試劑闆中包被的(de)抗體(tǐ)結合，抗體(tǐ)上(shàng)面标記 ‌¶的(de)物(wù)質呈現(xiàn)顔色變化(huà)，出現(xiàn)對(duì)應條™↔ ✔帶，通(tōng)過觀察條帶可(kě)以得(de)到(dào)相(xiàng)關的(de)檢測 ≠∏π結果。抗體(tǐ)标記物(wù)一(yī)↕↓般為(wèi)膠體(tǐ)金(jīn)、乳膠顆粒和(hé)量' 子(zǐ)點熒光(guāng)納米微(wēi)球等材料。這(zhè)個(gè)方法在臨床">應用(yòng)中操作(zuò)簡便，速度快(ku→±↔σài)，10-15分(fēn)鐘(zhōng)就(jiù)可(kě)獲得&≥ε÷(de)檢測結果，可(kě)以做(zuò)床旁檢測。病毒感染人≈$ (rén)體(tǐ)後一(yī)般會(huì)經曆一(yī)段時(shí)♦λ間(jiān)的(de)“潛伏”進行(xíng)病™®¶毒複制(zhì)，随後病毒大(dà)量排出引發病理(lǐ)反應。病毒抗原檢測™'标本一(yī)般為(wèi)上(shàng)呼吸道(dào)λ'≠≤标本，一(yī)般采用(yòng)口咽拭子(zǐ)或鼻 ₩☆咽拭子(zǐ)進行(xíng)取樣，在發病初期具有(yǒu)良好(hǎo)的≈÷ ‍(de)檢測效果，但(dàn)随病情的(de)發展和(hé)治療其檢測陽性率有(yǒu)ε♥ ★所下(xià)降。

目前臨床上(shàng)應用(yòng)最廣泛的(de$≠$≈)病毒抗原快(kuài)速檢測技(jì)術(shù)Ω☆ 是(shì)針對(duì)流行(xíng)性感冒的(de)檢測，全國(guó)有(yǒu)超過10‌"♦"家(jiā)廠(chǎng)家(jiā)可(kě)生(shēng)産針對(duì)流感ε'•病毒抗原快(kuài)速檢測的(de)試劑。流感抗原檢測的(d↓★✘λe)靶标一(yī)般是(shì)流感病毒NP和(hé)M©®✔P蛋白(bái)，可(kě)以确定病毒是(shì)甲型還(hái)是(shì)乙型≠ ε¶，但(dàn)無法确定病毒的(de)亞型。流感病毒抗原檢測一(yī)般采用(yòng±δ)膠體(tǐ)金(jīn)标記，也(yě)有(yǒu)采用(yòng)熒光(guāng)标記≠≥法進行(xíng)标記的(de)，熒光(guāng)标記法會(huì)比膠體(tǐ)金(jīn)标πα ✔記的(de)方法敏感性更高(gāo)，多(duō©←₩σ)需相(xiàng)應儀器(qì)，如(rú)熒光(guāng)₽ ≈顯微(wēi)鏡，熒光(guāng)檢測設備。流感病毒抗原檢測試劑的(de)敏感性受到(™♣dào)抗體(tǐ)原料和(hé)标記物(wù)性能(néng)的(λ‌→de)影(yǐng)響極大(dà)，使不(bù)同廠(chǎng)家(jiā↑₽≤)檢測試劑的(de)敏感性跨度較大(dà)，一(yī)般在20%-70%之間£✘(jiān)，并且在病毒載量較低(dī)↑✘ 時(shí)無法檢測到(dào)目标病毒，檢測陰性不(bù)能(néng)作(zuγ✔π♠ò)為(wèi)排除流感感染的(de)診斷标準，各廠(chǎng)家(jiā)流感抗λ 原檢測試劑的(de)特異性一(yī)般在90%以上(s ¥hàng)，因此檢測陽性支持診斷。在國(guó)家(jiā)衛健委發布的( <₽de)《流行(xíng)性感冒診療方案（2019年(nián)版）》中推薦∑£流感病毒抗原檢測可(kě)作(zuò)為(wèi)确診方法，但(dàn)同時(sε↑hí)也(yě)提示其檢測陰性不(bù)能₹γΩ♠(néng)排除流感。抗原檢測方法因其快(kuài)速方便，特異性好(hǎo)，比較容易在 γα各層級醫(yī)院中普及。

反觀針對(duì)新型冠狀病毒2019-nCoV抗原的(de≈ε₩§)檢測則尚處于前期研發階段，尚無有(yǒu)注冊申報(bào)的(dφλ₹e)産品出來(lái)，究其主要(yào)原因應與試劑原材料有(yǒu)關，主要(yào) ‍♥是(shì)目前尚無法獲得(de)針對(duì)"λ>新型冠狀病毒2019-nCoV抗原蛋白(bái)特異性高(₩₽≈₩gāo)的(de)單克隆抗體(tǐ)。盡管早♠£ε在2020年(nián)1月(yuè)底就(jiù)有(yǒu)公司"β聲稱獲得(de)了(le)新型冠狀病毒2019-nCoV抗原蛋白(bái)的(de)♣≥→£抗體(tǐ)，至今也(yě)有(yǒu)數(shù)家(jiā)公司宣布可(kě)對(d¥≥uì)外(wài)提供相(xiàng)應抗體(tǐ)，但↔✘ (dàn)通(tōng)過查詢相(xiàng)關信息并進行(xíng)深入分(fēn)析可★♠>•(kě)得(de)知(zhī)目前可(kě)提★δ₹供的(de)新型冠狀病毒2019-nCoV₽→¥₩抗原蛋白(bái)抗體(tǐ)應均為(wèi)通 £₽(tōng)過動物(wù)免疫獲得(de)的(de)多(duō)抗而并↔≈非單克隆抗體(tǐ)，如(rú)采用(yòng)多(duō)抗作✔ (zuò)為(wèi)原料生(shēng)産新型冠狀病毒2019-nCoV抗原檢測試劑×↕≤則會(huì)對(duì)試劑檢測結果造成極®<≥大(dà)影(yǐng)響。即使經過一(yī)段時(shí)間(jiān)的(>λ de)研發和(hé)生(shēng)産有(yǒu)公司可(Ωγ ✘kě)提供針對(duì)新型冠狀病毒2019-nCoV抗原蛋白(bá↔✘i)的(de)單克隆抗體(tǐ)，其作(zuò)為(wèi)原材δ‍料加入到(dào)抗原檢測試劑中的(de)效果仍需要(yào)大(dà)"≈α♥批臨床實驗數(shù)據的(de)驗證。然而流感病毒在全球範圍內(nèi)肆虐百年(nián)， ✘≤并且每年(nián)有(yǒu)周期性的(de)流行(xíng)，國(guó)內(n§<èi)外(wài)能(néng)夠生(shēng)産流感病毒抗原單克隆抗₹δ☆¥體(tǐ)的(de)廠(chǎng)家(jiā)超過百家(jiā)，因此生$↔€(shēng)産抗原檢測試劑的(de)廠(chǎng)家(ελjiā)可(kě)以獲得(de)性能(nénφσ÷εg)較好(hǎo)的(de)單克隆抗體(tǐ)原材料進行(xíng)研發和€π‌α(hé)生(shēng)産，最終獲得(de)流感病毒抗原檢測試劑。綜上(shàn ±∏€g)所述，新型冠狀病毒2019-nCoV抗原♣"檢測試劑尚有(yǒu)很(hěn)長(cháng)的(de)一☆♣ γ(yī)段路(lù)要(yào)走，但(dàn)一(yī)旦試劑研發成功并獲得(de)國↔→σ(guó)家(jiā)藥監局的(de)注冊審批則完全可(kě)以∏☆≠↔快(kuài)速應用(yòng)到(dào)臨床，以其&>♠→操作(zuò)簡單、檢測速度快(kuài)、特異性高(gāo)、易普及等優點會→® γ(huì)快(kuài)速被各層級醫(yī)療機(jī)構廣泛接受。

3、病毒抗體(tǐ)檢測

抗體(tǐ)（Antibody）是(shì)指機(jī)體(tǐ)由于抗原的(d<∞&✘e)刺激而産生(shēng)的(de)具有(yǒu)保護作(zuò)用Ω®♣(yòng)的(de)蛋白(bái)質，是(s✘‍¶↑hì)一(yī)種由漿細胞（效應B細胞）分(fēn)泌，被免疫系統用(↔φyòng)來(lái)鑒别與中和(hé)外(wà<× ‍i)來(lái)物(wù)質如(rú)細菌↑∏↑、病毒等的(de)大(dà)型Y形蛋白(bái)質，僅被發現(xiàn)存在于脊椎¶∑ε動物(wù)的(de)血液等體(tǐ)液∏§↔™中，及其B細胞的(de)細胞膜表面。抗體(tǐ)是(shì)一(yī)類能(néng)與抗原特σ☆異性結合的(de)免疫球蛋白(bái)(immunoglobulin，Ig)，由四條×≠β多(duō)肽鏈組成，各肽鏈之間(jiān)由數(shù)量不(bù)等的(d₽≥e)鏈間(jiān)二硫鍵連接，大(dà)緻可(kě)分(fēn)為(wèi)5類，即IgM©λ、IgD、IgG、IgA和(hé)IgE。人(rén)體(tǐ)在接觸外(w♦ ≤ài)來(lái)抗原（Antigen）的(de)時(sh€ββí)候，最早産生(shēng)的(de)抗體(tǐ)是(shì←≥≥)IgM，是(shì)由B細胞表面受體(tǐ)直接>♠分(fēn)泌，産生(shēng)IgM的(de)B細胞進入淋巴結，在發生(s≤×hēng)中心接受T細胞和(hé)抗原提呈細胞Ω&的(de)刺激，進一(yī)步成熟，分(fēn)化(huà)為(→↔δ♠wèi)漿細胞，大(dà)量産生(shēng)↕↔★₹IgG。

目前臨床上(shàng)針對(duì)抗體(tǐ)的(de)檢>✘'測一(yī)般也(yě)采用(yòng)前面抗原檢測中提到(dào)的(de)免疫層析技(j®εì)術(shù)，但(dàn)檢測試劑原料與抗原檢測不Ω'÷(bù)同，抗體(tǐ)檢測是(shì)利用(yòng)病毒抗原蛋白(&✔bái)來(lái)識别血液标本中的(de)$<£病毒由病毒感染所産生(shēng)的(de)↑↔抗體(tǐ)，一(yī)般針對(duì)血液中病毒特異性的(de)Iφ≈®gM和(hé)IgG進行(xíng)檢測。

IgM是(shì)初次體(tǐ)液免疫應答(dá)↔≠中最早出現(xiàn)的(de)抗體(tǐ)，IgG是(shì)血清和(‍γhé)體(tǐ)液中含量最高(gāo)的(de)抗體(tǐ)，占血清總Ig的(de)75%～α®π80%，其親和(hé)力高(gāo)，在體(tǐ)內(nèi)分(fēn)布廣泛→✘↕。抗體(tǐ)檢測的(de)方法，之前應用(yòng)的(de)比較多(duō)，但(β÷£ dàn)随著(zhe)我們認知(zhī)的(de)逐漸提高(gāo)，在2019年(nián)的± ↓∞(de)流感診療方案中已經很(hěn)明(míng)确流感病毒IgG 抗體(tǐ)水(shuǐ)₽ ✘ 平恢複期比急性期呈4 倍或以上(shàng)升高(gāo)僅有(yǒu)回顧性診斷意義，無×πλ法用(yòng)于病毒感染的(de)診斷，而IgM 抗體(tǐ)檢測敏感性較低(dī)，不(b₹↔♦ù)建議(yì)常規使用(yòng)。其實不(bù)•Ω↔¶僅是(shì)不(bù)适合流感的(de)診斷，大(dà)多(duō)數(shù)☆β呼吸道(dào)病毒都(dōu)不(bù)需要(yào)這(zhè)種抗體(tǐ)檢測方法，∞α→其主要(yào)原因是(shì)抗體(tǐ)¥α一(yī)般在患者恢複期才大(dà)量産生(shēng)，時(shí)效性差，無法作(zuò)為←λ​λ(wèi)病毒感染的(de)早期診斷，對(duì)傳染性♦>極高(gāo)新型冠狀病毒2019-nCoV的(de)診斷和(hé)防控毫無意義。因此，目前各項新型冠狀病毒2019-nCo∑♠→≈V防治診療指南(nán)中均未把病毒抗體✘λ>§(tǐ)檢測列入病原學檢測項目。

4、病毒核酸檢測

所有(yǒu)生(shēng)物(wù)除朊病毒外(wài"γ )都(dōu)含有(yǒu)核酸，核酸包括脫氧核糖核酸（DNA）和(hé)核糖核酸"↕α‌（RNA），新型冠狀病毒是(shì)一(yī)種僅含有(yǒu)RNA的(d★'e)病毒，病毒中特異性RNA序列是(shì)區(qū)分(fēβ ™↔n)該病毒與其它病原體(tǐ)的(de)标志(zhì)物(wù)。新型冠狀病毒2019-nC←©™>oV出現(xiàn)後，我國(guó)科(kē)學家(☆♠∞jiā)在極短(duǎn)的(de)時(shí)間(jiā♠₹ n)裡(lǐ)完成了(le)對(duì)新型冠狀病毒2019-nCoV€♠♦‌全基因組序列的(de)解析，并通(tōng)過與其它物(wù)種的(de)基因組序列對(du♦¥®ì)比，發現(xiàn)了(le)新型冠狀病毒2019-nCoV中的(de)特異核酸✔$★序列。臨床實驗室檢測過程中，如(rú)果能(né±≤÷ng)在患者樣本中檢測到(dào)新型冠狀病毒2019-nCoV的(de)特異↔∏核酸序列，應提示該患者可(kě)能(néng)被新型冠狀病毒2019-nCoεγ$≥V感染。

檢測新型冠狀病毒2019-nCoV特異核酸序列的(de)方法最常見(jiàn)的₩☆(de)是(shì)熒光(guāng)定量PCR（聚合酶鏈式反應）。因PCR反應模闆僅為(w↔←èi)DNA，而新型冠狀病毒2019-n©ε☆≥CoV為(wèi)RNA病毒，因此在進行(xíng)PCR反應前，應将新型冠狀病毒核酸（RNA）→↓逆轉錄為(wèi)DNA。在PCR反應體(tǐ)≤✔系中，包含一(yī)對(duì)特異性引物(wù)以及一(yī)個(gè)探針，該探β↓¥₩針為(wèi)一(yī)段特異性寡核苷酸序列，兩端分(fēn)别标記了★↕(le)報(bào)告熒光(guāng)基團和(hé)淬滅熒光(guāng)基團。探針完>¥整時(shí)，報(bào)告基團發射的(de)熒光(guāng)&♥φ信号被淬滅基團吸收；如(rú)反應體(tǐ)系存在靶序列，PCR反應時(shí)探針與模≤∞‌闆結合，DNA聚合酶沿模闆利用(yòng)酶的(de)外(wài)切酶活性将探針酶切↑β降解，報(bào)告基團與淬滅基團分(fēn)離§±(lí)，發出熒光(guāng)。每擴增一(yī)條DNA鏈，就(₩∞  jiù)有(yǒu)一(yī)個(gè)熒光(guāng)分(fēn)子(zǐ)産生(sh'★ēng)。熒光(guāng)定量PCR儀能♣λ≠(néng)夠監測出熒光(guāng)到(dào)達預先設定阈值的(de)循 ↑•環數(shù)（Ct值）與病毒核酸濃度有(yǒu)關，¥ $±病毒核酸濃度越高(gāo)，Ct值越小(xiǎo)。

核酸檢測是(shì)分(fēn)子(zǐ)診斷的(de)σ♣σ≥主要(yào)技(jì)術(shù)手段，是(shì)當前臨床 ♣☆ 病原微(wēi)生(shēng)物(wù)診斷技(jì)術(shù)的(de)前沿，∑δ是(shì)肺部感染診斷技(jì)術(shù)的(de)發展方向，該方法的(™¥♣de)敏感性超過90%，特異性更是(shì)接近(jìn)100%，目前已™☆經在臨床上(shàng)被廣泛用(yòng)于各種呼吸道(dào)•ε÷§病原體(tǐ)的(de)确診檢測。國(guó)家(j€∞≥ iā)衛健委發布的(de)《流行(xíng)性感冒診療方案（2019年(nián)版）》中指出“✘∑：病毒核酸檢測的(de)敏感性和(hé)特異性↔↔很(hěn)高(gāo)，且能(néng>α♠β)區(qū)分(fēn)病毒類型和(hé)亞型。目前主要(yào)包括實時(shí)熒'♣光(guāng)定量PCR 和(hé)快(kuài)速多(duō)重PCR。熒光(α<£∑guāng)定量PCR 法可(kě)檢測呼吸道(dàδπ↕±o)标本（鼻拭子(zǐ)、咽拭子(zǐ)、鼻咽或氣管抽取物(wù)<≈↔、痰）中的(de)流感病毒核酸，且可(kě)區(qū)λΩ分(fēn)流感病毒亞型。” 在目前公布的(de)各項新型冠×★∏狀病毒2019-nCoV防治診療指南(nán)中均把呼吸道(dào)或血液标本中的(de)新型φδ£冠狀病毒2019-nCoV核酸檢測陽性定為£φπ∞(wèi)确診方法。

但(dàn)随著(zhe)新型冠狀病毒2019-nCoV核酸檢測試劑的(de)廣泛投入使用£•(yòng)，越來(lái)越多(duō)的(de)問(wèn)題暴♦∏±×露出來(lái)，其中最引人(rén)注意的(de)是(shì)病毒核酸檢測出>≤♠現(xiàn)過多(duō)假陰性的(de)問(wèn)£₹題，敏感性超過90%核酸檢測試劑為(wèi)何存在較多ε↓(duō)的(de)假陰性結果，我們針對(duì)此問(wèn)題也(yě)整理(&×lǐ)了(le)相(xiàng)關資料并在此進行(xíng)詳細描述。總體(t"δ ♠ǐ)上(shàng)講核酸檢測的(de)結果受到(dào)疾病發展過程、标本采集、标☆±↔本保存與運輸、核酸提取、擴增體(tǐ)系、檢測操作(zuò)環境以及人(rén)員(yuá÷€§n)操作(zuò)等因素的(de)影(yǐng)響。

5、病原學檢測方法的(de)選擇：

由于新型冠狀病毒2019-nCoV的(de)臨床研究有(yǒu)φ©₹​限，因此我們參考流感檢測時(shí)間(jiān)窗(chuāng)$π©口明(míng)确當前新冠病毒2019-nCoV的(de)實驗室檢測方法的(de®≠₽)選擇。根據流感檢測的(de)時(shí)間(jiān)窗(₹↕±≠chuāng)口我們可(kě)以看(kàn)到(dào)<✔比如(rú)POCT、熒光(guāng)檢測技(jì)術(shù)✔ελ、病毒分(fēn)離(lí)培養法、RT-PCR、抗體(tǐ)檢測等方法，它★↔們檢測的(de)時(shí)間(jiān)和(hé)時(s∞£πhí)間(jiān)段有(yǒu)所不(bù)同，病毒抗↑♠‌ 原檢測（以POCT或熒光(guāng)檢測技(jì)術(shù)開(kāi)展），病毒£©™分(fēn)離(lí)培養法和(hé)核酸檢測（以RT-PCR技(jλ₹☆₩ì)術(shù)開(kāi)展）的(de)檢測窗(chuāng)口靠前，抗體(tǐ≤σ)檢測滞後。呼吸道(dào)病毒診斷做(zuò)抗體(tǐ)檢測或者培養在臨床診斷中價值不(bù≥<÷)高(gāo)，前者影(yǐng)響因素太多(duō)（如(rú)産±•ππ生(shēng)抗體(tǐ)的(de)時(shí)間(jiān)窗₽→φ(chuāng)較長(cháng)，受人(rén)體(tǐ)ε'✔¶自(zì)身(shēn)免疫狀況影(yǐng)響較大(dà)），後者很(hěn)難滿足‌Ω₩即時(shí)檢測的(de)需求。因此在各項指南(nán)和(hé)共★✘÷Ω識中指出目前臨床上(shàng)針對(duì)流感病毒的(de)病原學檢測集中于抗原檢測和(hé)​®★核酸檢測兩項，而針對(duì)新型冠狀病毒2019-nCoV的(de)病原學檢測僅限于核酸'™•‍檢測。

總結

針對(duì)上(shàng)文(wén)論述，我們總結了(l'>✔‌e)不(bù)同方法學的(de)差異：

中華人(rén)民(mín)共和(hé)國(guó)國(guó)家(jiā)衛生(sh✔γ←®ēng)健康委員(yuán)會(huì)發布的(d‍☆€→e)《新型冠狀病毒感染的(de)肺炎診療方案（試行(xíng)第五版修正版¥γ）》、《新型冠狀病毒肺炎防控方案（第四版）》、《WS 286-20<♦δ♥08 傳染性非典型肺炎診斷标準》、《流行(xíng)性感冒診療方案（2019年(nián)版）》

武漢大(dà)學中南(nán)醫(yī)院新型冠狀病毒感染的(de)肺炎防治課題組發Ω&•₽布的(de)《新型冠狀病毒(2019-nC≈ ¶oV)感染的(de)肺炎診療快(kuài)速建議(yì)指南(nán)（标準版）》

北(běi)京協和(hé)醫(yī)院發布的(de)《關于“新型冠狀病毒感染的(de)肺炎”診療建議(yì)方案（V2.0）》

中華醫(yī)學會(huì)兒(ér)科☆§ (kē)學分(fēn)會(huì)呼吸學組呼吸道(dào)感染協作(zuΩ≈‍ò)組發布的(de)《兒(ér)童呼吸道(dào)感染微(wēi)生(shēng)物®‌"(wù)檢驗标本采集轉運與檢測建議(yì)（病毒φ"篇）》