
聚合酶鏈式反應(PCR)是(shì)一(yī)種用(yòng)于放(fàng)大(d δφà)擴增特定的(de)DNA片段的(de)分(fēn)子(zǐ)生(s$↓hēng)物(wù)學技(jì)術(sh♥ ←ù),通(tōng)過對(duì)基因的(de)選擇性®→片段進行(xíng)體(tǐ)外(wài)高(gāo)效擴增,從(cón↔σg)而實現(xiàn)目的(de)基因的(de)檢測。
PCR-熒光(guāng)探針法的(de)主要(yào)原理(lǐ)是(shì):PCR擴增時(s←♣₩hí)在加入一(yī)對(duì)引物(wù)的(de)同時(shíγ±)加入一(yī)個(gè)特異性的(de)熒光(guāng←≥≤)探針,該探針為(wèi)一(yī)寡核苷酸,兩端分(fēn)别标記一(yī)個(gè)報(bà<§'o)告熒光(guāng)基團和(hé)一✔↕(yī)個(gè)淬滅熒光(guāng)基團。探針完整時(shí),報(b₩ ào)告基團發射的(de)熒光(guāng)信号被淬滅基團吸收;随著(zβ'™☆he)PCR擴增,Taq酶的(de)5'端-3'端外(wài×☆®★)切酶活性将探針酶切降解,使報(bào)告熒光(γ∞✘♦guāng)基團和(hé)淬滅熒光(guāng)基團分(fēn)離(lí),從←↔♠&(cóng)而熒光(guāng)監測系統可(kě)接收到(dào)熒光(∏®αguāng)信号,即每擴增一(yī)條D♦→✘NA鏈,就(jiù)有(yǒu)一(yī)個(gè)熒光(guāng)分(fēn)≠↕子(zǐ)形成,實現(xiàn)了(le)熒光(≤↕☆ guāng)信号的(de)累積與PCR産物(wù)形成完全同步。
日(rì)期:2024-12-31
日(rì)期:2024-12-17
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